标准集团:GB/T 7918.3-1987 化妆品微生物标准检验方法,化妆品粪大肠菌群检测
粪大肠菌群细菌来源于人和温血动物的粪便。检出粪大肠菌群表明该化妆品已被粪便污染,有可能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体的危险。因此粪大肠菌被列为重要的卫生指标菌。
1 方法提要
根据粪大肠菌群所具有的生物特性,如革兰氏阴性无芽胞杆菌在44℃培养24~48h能发酵乳糖产酸并产气,能在选择性培养基上产生典型菌落,能分解色氮酸产生靛基质。
2 培养墓和试剂
2.1 乳糖胆盐培养基
成分:蛋白陈 20g
猪胆盐 5g
乳糖 5g
0.4%溴甲酚紫水溶液 2.5ml
蒸馏水 1000ml
制法:将蛋白陈、胆盐及乳糖溶于蒸馏水中,调pH到7.4,加入指示剂,混匀,分装试管(每支试管中加一个小倒管)。115℃20min灭菌。
2.2 双倍浓度乳糖胆盐培养基
按上述乳糖胆盐培养基成分,燕馏水量不变,其他成分量加倍。
2.3 伊红美蓝(EMB)琼脂
成分: 蛋白陈 10g
乳糖 10g
磷酸氢二钾 2g
琼脂 20g
2%伊红水溶液 20ml
0.5%美蓝水溶液 13ml
蒸馏水 1000ml
制法:先将琼脂加到900 ml蒸馏水中,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾蛋白陈,混匀,使之溶解。再以蒸馏水补足至1000ml。校正pH值为7.2-7.4,分装于烧瓶内,121℃ 15 min高压灭菌备用。临用时加入乳糖并加热融化琼脂。冷至60℃左右以无菌手续加入灭菌的伊红美蓝溶液,摇匀。倾注平皿备用。